RNA的提取方法步骤及原理

生活 2020-09-11 10:25:23 1个回答   ()人看过

原理:TRIZOL试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA开释到溶液中。当加进氯仿时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进进水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层主要为RNA,有机层主要为DNA和蛋白质。

步骤:

1、先将研钵晾干够,倒入三分之一体积的液氮,加入0.2克均质的植物材料,充分研磨后转入一个含有300微升GMT的

1、5毫升的离心管中,摇匀。

2、然后,加入30微升2摩尔每升的醋酸钠进行摇匀,加入300微升酸酚摇匀,加入100微升的氯仿摇匀。

3、然后,在四摄氏度12000转每分钟下离心二十分钟,吸取上清液的四分之三,加入等体积的异丙醇,于冰上放置十五分钟。

4、最后,将上清液中加入等体积的氯仿摇匀,进行抽提。

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